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A549 Cells GFP-EGFR

A549 细胞 GFP-EGFR

品牌
Sigma-Aldrich
货号
CLL1141
包装型号
规格纯度
参考价格
58587.1 *本价格含增值税费
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-+
产品名称:
A549 Cells GFP-EGFR
A549 细胞 GFP-EGFR
产品介绍:

产品说明

一般描述

A549 GFP-EGFR 是肺癌,来自于一个 ZFN 修饰的 58 岁男性白种人的上皮细胞,产生了内源性 EGFR 基因位点表达的 EGFR-GFP 转基因。
该细胞系来自 ATCC 产品号:CCL-185。
糖皮质激素是诱导 A549 细胞对 OSM(抑癌蛋白M)、白细胞介素 (IL-6) 和成纤维细胞条件培养基产生应答所必需的。EGFR 基因定位于人类染色体 7p11.2,编码一个 170属于受体酪氨酸激酶 HER 家族的 kDa 受体蛋白。 Egfr 定位于上皮细胞表面。

应用

A549 细胞 GFP-EGFR 是利用 CompoZr ® 锌指核酸酶技术将基因组 EGFR 基因内源性标记绿色荧光蛋白基因 (GFP) 的 A549 细胞系。整合导致内源性表达融合蛋白,其中 GFP 连接到 EGFR 的 C 端。荧光成像显示特征性 EGFR 膜表达。加入 EGF 后,细胞系显示 EGFR 从细胞膜再分布到核内体,使其可用于化合物的高含量筛选。例如,EGFR 的选择性抑制剂 Tyrphostin AG 1478 可消除再分布。该稳定细胞系从单个克隆中扩增。与通过外源启动子过表达的细胞系相比,该靶标的基因调控和相应的蛋白功能得以保留。

特点和优势

锌指核酸酶 (ZFN) 介导的荧光 GFP 标记靶向集成到染色体 7p11.2 上 EGFR 基因的最后一个编码外显子,以创建一个细胞系,该细胞系表现出用 GFP 标记的转基因在蛋白 C 端稳定表达。
这些 A549 细胞可贴壁,倍增时间约为 22 小时。

质量

检测支原体、无菌性、冷冻后活力、细胞系鉴别的短末端重复序列 (STR) 分析、细胞系种属确认的细胞色素氧化酶 I (COI) 分析。

制备说明

媒介更新每周更换两到三次。
通过在 37℃ 水浴中轻轻搅拌(约 2 分钟)快速解冻小瓶,使瓶盖远离水。用 70% 乙醇消毒,加入 9 mL 培养基并离心 125 xg(5-7 分钟)。在完全培养基中重悬,并在 37℃、5% CO2 大气环境中孵育。
传代培养比例:约 1:3-1:6
该细胞系的基础培养基为 RPMI-1640,(产品号:R0883。为制备完全生长培养基,向基础培养基中加入以下组分:胎牛血清, 产品号:F2442 ,至终浓度 (v/v) 10%,L-谷氨酰胺, 产品号:G7513 ,最终浓度为 2 mM。
细胞冷冻培养基-DMSO 1X, 产品号:C6164

法律信息

CompoZr is a registered trademark of sigma-aldrich Co. LLC

基本信息

NACRESNA.81

产品性质

质量水平200
生物来源human male lung (Source Disease: Lung carcinoma)
OMIM登记号131550
储存温度−196℃
Gene Informationhuman ... EGFR(1956), ERBB1(1956)

安全信息

储存分类代码10 - Combustible liquids
WGKWGK 2
闪点(F)192.2 °F - closed cup
闪点(C)89 ℃ - closed cup

Sigma-Aldrich

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