产品说明

一般描述

Cas9-D10A切口酶共表达质粒RFP使用CMV启动子，可获得较强的Cas9-D10A瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。同时，使用XbaI酶切可使Cas9D10A表达质粒线性化，得到基于T7的mRNA产物。

应用

功能基因组
配对 Cas9 Nickase + RFP 用于：

• 在多种细胞系中进行基因敲除
• 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
• 建立基因敲入细胞系，将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中

组分

1管含1μg Cas9-D10A Nickase-RFP质粒
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。

外形

2 μg Sigma Cas9-D10A 切口酶-RFP 质粒

其他说明

来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统经过包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA)，该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR)，对目标DSB进行修复。RFP通过2A肽段连接，与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达，实现了对转染效率的追踪，也能通过荧光激活细胞分选术(FACS)对基因组编辑活性进行富集。

法律信息

CRISPR专利正在申请中

基本信息

产品性质

安全信息