产品说明
应用
推荐用于抗体和蛋白质缀合的高比活性等级。
碱性磷酸酶可与抗体和其他蛋白质偶联,用于ELISA、蛋白质免疫印迹和组织化学检测。 它通常用于蛋白质(如酪蛋白)和核酸的去磷酸化。 当需要高灵敏度时,它可用于蛋白质标记。 碱性磷酸酶也可用于使DNA或RNA的5′-末端去磷酸化,从而防止自身连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后,DNA或RNA还可被放射性标记磷酸盐标记(通过T4多核苷酸激酶)。 产品P6774已可用于制备脑裂解物。
Sigma的碱性磷酸酶已可用于制备AP-BGG(碱性磷酸酶-牛γ球蛋白)偶联物。在免疫学测定中,它已经与绵羊抗兔IgG和绵羊抗兔IgM偶联。它还被用于制备HRP标记的双酶偶联物,用于同时检测单个组织切片中的三种不同细胞内Ig决定簇。
碱性磷酸酶可用于酪蛋白和其他蛋白质的去磷酸化。碱性磷酸酶还可用于 DNA 或 RNA 的 5′-末端的去磷酸化,以防止自我连接。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后,DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记(通过 T4 多核苷酸激酶)。
包装
1000, 2000, 10000, 50000 units in poly bottle
生化/生理作用
来自牛肠粘膜的碱性磷酸酶在pH 7.5-9.5范围内最稳定。该酶对醇、胺、焦磷酸盐和酚的磷酸酯具有广泛的特异性,并且需要锌和镁或钙二价离子才能发挥活性。
该酶对醇类、胺类、焦磷酸盐以及酚类的磷酸酯具有广泛的特异性。常用于蛋白质和核酸的去磷酸化。
该酶是一种糖蛋白,含有约12%的碳水化合物(6%己糖和6%其他中性糖)。每个碱性磷酸酶分子含有四个锌原子和四个二硫键。在镁存在下,碱性磷酸酶可达到最大活性。它能催化磷酸单酯的水解,例如对硝基苯磷酸酯,苯基磷酸酯,酚酞磷酸酯,α-甘油磷酸酯,β-甘油磷酸酯,2-磷酸甘油酯,磷酸丙糖酯,葡萄糖-6-磷酸酯,葡萄糖-1-磷酸酯,果糖-1-磷酸盐,果糖-6-磷酸盐,腺苷5-磷酸腺苷-3-磷酸酯,磷酸烯醇丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯。砷酸盐、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐、磷酸二异丙酯、磷酸三苯酯、氟代磷酸二异丙酯和L-苯丙氨酸是碱性磷酸酶的强抑制剂。
物理属性
牛肠碱性磷酸酶为二聚膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶,每个单体通常拥有两个 N-连接多糖和一个或多个 O-连接多糖。2 该酶需要锌以及镁或钙二价离子才能显示活性。
牛肠道碱性磷酸酶是一种二聚化的膜衍生糖蛋白。其存在至少三种异构体,每个单体通常具有两个N-连接的和一个或多个O-连接的聚糖。
牛肠碱性磷酸酶是一种二聚体形式的膜衍生糖蛋白。至少存在三种同工酶,每个单体通常具有两个N-连接的多糖和一个或多个O-连接的聚糖。
单位定义
在pH 9.8,37℃条件下,一个DEA单位可每分钟水解1 μmole的4-硝基苯基磷酸酯。(一个甘氨酸单位相当于~3个DEA单位)
外形
溶剂为3.0 M NaCl,含 5 mM MgCl2、0.2 mM ZnCl2和30 mM三乙醇胺,pH 7.6
制备说明
亲和纯化
分析说明
包装规格取决于 DEA 单位
通过缩二脲法测定的蛋白质。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.1.3.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
MDL编号 | MFCD00131849 |
eCl@ss | 42010105 |
NACRES | NA.54 |
产品性质
形式 | buffered aqueous solution |
质量水平 | 200 |
specific activity | ≥2,000 DEA units/mg protein |
分子量 | dimer ~160 kDa |
浓度 | 5-20 mg/mL |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
WGK | WGK 3 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
个人防护装备 | Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US) |
Sigma-Aldrich