产品说明
应用
该产品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。研究表明，它适用于肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞分离和肝细胞制备。胶原酶也用在糖基化终末产物的研究中制备动脉组织。经测试，该酶以约 1mg/mL 的浓度消化肝细胞。消化浓度范围为 0.1 至 5 mg/mL。
用于消化胶原蛋白并从基质中释放贴壁细胞。
生化/生理作用
胶原酶产物是 C. histolyticum分泌的酶混合物，可通过分泌酶中10-18个组分的相对比率来区分不同的产物。 其主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶、和一种中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞均是必需的。 各种类型的胶原蛋白都是胶原酶的天然底物。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
注意
未开封的产品可在-20℃下稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下储存30天，FALGPA或蛋白酶活性无损失。如果将粗制胶原酶溶液分装(10 mg/mL)后快速冷冻并冷藏在-20℃下，可稳定保存。后续的冻融循环将破坏溶液。若将本品放在冰上，可在7小时内保持100%活性。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
这种胶原酶是从 VII 型(C0773)溶组织性梭菌培养滤液中获得的。人们认为该培养滤液含有至少 7 种分子量为 68-130kDa 的不同蛋白酶。通常使用 TESCA 缓冲液(含有 50 mM TES，0.36 mM 氯化钙，pH 7.4，37℃)以 1-2 mg/mL 制备溶液。
基本信息
| 酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB ) |
| EC 号 | 232-582-9 |
| MDL编号 | MFCD00130830 |
| NACRES | NA.75 |
产品性质
| 质量水平 | 200 |
| 生物来源 | Clostridium histolyticum |
| 形式 | powder |
| specific activity | ≥4 FALGPA units/mg solid ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units) |
| 分子量 | 68-130 kDa |
| 纯化方式 | chromatography |
| technique(s) | cell culture | mammalian: suitable |
| pH值(酸碱度) | 7.4 |
| web metadata keyword.default | collagen digestion, adherent cell release, cell passaging |
| 异质活性 | neutral protease and clostripain ≤1 unit/mg solid |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 象形图 |  |
| 警示用语： | Danger |
| 危险声明 | H334 |
| 预防措施声明 | P261 - P284 - P501 |
| 危险分类 | Resp. Sens. 1 |
| 储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
| WGK | WGK 1 |
| 闪点(F) | Not applicable |
| 闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich
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