产品说明
一般描述
Akt 是 PI3 激酶途径的主要已知效应子。PIP3 的产生导致 PDK1 激活,该蛋白使 Thr308 上的 Akt 磷酸化,另一种激酶复合物(一般认为是 mTORC2 复合物,或可能是连接两者的中间激酶)使 Ser473 上的 Akt 磷酸化。这些位点磷酸化可加成激活 Akt Ser/Thr 激酶活性,使用针对这些位点中任一位点的磷酸化状态特异性抗体可暗示 Akt 激活。Akt 的激活可以直接通过免疫沉淀,然后用放射性标记的 ATP 磷酸化已知底物来进行测量。研究表明,Akt 可以磷酸化 70 多种底物,包括 mTOR 信号传导中的 TSC1&2、BAD(Ser136)、GSK3(其可以通过这种磷酸化作用而失火),转录因子 FoxO 家族 PRAS40、AS160。
特异性
识别 Akt1/PKBα,分子量 〜60 kDa。
免疫原
对应于大鼠 Akt1 的 C 末端(残基 466-480)的 15 个残基合成肽(C-RPHFPQFS YSASGTA),并添加 N 末端半胱氨酸用于偶联。 Akt1 序列与小鼠 Akt1(15/15 个氨基酸)相同,在牛 Akt1(14/15 个氨基酸)和人 Akt1(13/15 个氨基酸)中高度保守。 人 Akt2 与肽免疫原序列共有 11/15 个氨基酸。
表位:C端
应用
该抗 Akt1/PKBα 抗体经过验证可用在 IP,WB 中检测 Akt1/PKBα。
免疫沉淀激酶测定:
4 µg 先前批次的抗体从 1 mg 用 IGF-1 刺激的 HEK293 细胞中免疫沉淀了活性 Akt。
研究类别
信号传导
研究子类别
PI3K、Akt & mTOR 信号传导
质量
通过蛋白质印迹对人 A431 癌细胞的 RIPA 裂解液进行了评估。
蛋白质印迹分析:
0.5-2 µg/mL 的该抗体在人 A431 癌细胞的 RIPA 裂解液中检测到 Akt。
目标描述
~60 kDa
外形
形式:纯化的
纯化的兔多克隆抗体,在含有 0.1 M Tris-甘氨酸,pH 7.4、0.15 M NaCl,0.05% 叠氮化钠的缓冲液,然后添加甘油至 30% 的溶液中。
纯化的蛋白 A
储存及稳定性
自收到之日起,在 -20ºC 条下可稳定保存 1 年。
分析说明
对照
阳性对照包括:未刺激的 A431 细胞裂解液(12-301)。
其他对照:MCF7 全细胞裂解液
包括阳性抗原对照: 目录号 12-301,未刺激的 A431 裂解液。加入 2.5 µL 2-巯基乙醇/100 µL 裂解液,煮沸 5 分钟以减少制备量。 每个泳道上样 20 µg 还原裂解液以制备小凝胶。
其他说明
浓度:请参考批次特异性浓缩物的分析证书。
法律信息
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免责声明
除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。
基本信息
eCl@ss | 32160702 |
NACRES | NA.41 |
产品性质
生物来源 | rabbit |
质量水平 | 100 |
抗体形式 | purified antibody |
antibody product type | primary antibodies |
克隆 | polyclonal |
species reactivity | mouse, rat, human |
包装 | antibody small pack of 25 μg |
manufacturer/tradename | Upstate® |
technique(s) | immunoprecipitation (IP): suitable western blot: suitable |
同位素/亚型 | IgG |
NCBI登记号 | NP_001014431 |
UniProt登记号 | P31749 |
运输 | ambient |
安全信息
储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
WGK | WGK 1 |
Sigma-Aldrich