产品说明
应用
该产品适用于人类肿瘤,小鼠肾脏,人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。 消化浓度范围为0.1至5mg/mL。
生化/生理作用
胶原酶产物是 C. histolyticum分泌的酶混合物,可通过分泌酶中10-18个组分的相对比率来区分不同的产物。 其主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶、和一种中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞是必需的。 各种类型的胶原蛋白都是胶原酶的天然底物。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
注意
以原包装形式,该产品在-20℃下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下30天内,FALGPA或蛋白酶活性没有损失。如果分液(10mg/mL)形式快速冷冻并且在-20℃下冷冻保存,粗胶原酶的溶液可保持稳定。进一步的冻融步骤会破坏溶液稳定性。 当在冰上保持时,该产品可在7小时内保持100%活性。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
从I型(C0130)制备得到。可以通过在37℃下将0.05-0.1mg/mL胶原酶溶解在含有0.36mM氯化钙(TESCA,pH7.4)的50mM TES缓冲液中,以制备储备溶液。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB ) |
EC 号 | 232-582-9 |
MDL编号 | MFCD00130830 |
NACRES | NA.54 |
产品性质
质量水平 | 200 |
无菌性 | 0.2 μm filtered |
形式 | lyophilized powder |
specific activity | ≥125 CDU/mg solid 0.2-1.0 FALGPA units/mg solid |
分子量 | 68-130 kDa |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H334 |
预防措施声明 | P261 - P284 - P501 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
个人防护装备 | dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves |
Sigma-Aldrich