产品说明
应用
本品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。 使细胞解离所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物代数。
生化/生理作用
胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。 胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。 将EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除这些离子会增加酶活性。
丝氨酸蛋白酶抑制剂(包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等)会抑制胰蛋白酶。
组分
胰蛋白酶是由含223个氨基酸残基的单链多肽组成的，它通过切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽键以去除N-末端六肽而获得。 氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser残基处断裂，产生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。
注意
本品应置于-10至-40℃环境冷冻储存。避免反复冻融。
制备说明
本产品含有酚红。 由于在干冰上运输，包装中可能累积大量二氧化碳。 这些CO2可能会进入溶液并略微降低pH值，使溶液呈橙色而不是粉红色。 橙色溶液仍然可以使用，或者可以用氢氧化钠调节pH。 使用高浓度胰蛋白酶长时间孵育细胞，会破坏细胞膜并杀死细胞。 溶解胰蛋白酶或稀释浓缩胰蛋白酶溶液时，应使用不含Ca2+ 或Mg2+的缓冲盐溶液。
基本信息
| 酶学委员会(EC)编号 | 3.4.21.4 ( BRENDA | IUBMB ) |
| MDL编号 | MFCD00130286 |
产品性质
| 生物来源 | Porcine |
| 质量水平 | 400 |
| 无菌性 | sterile; sterile-filtered |
| 产品线 | BioReagent |
| 形式 | solution |
| 分子量 | 23.4 kDa |
| 浓度 | 1 × |
| technique(s) | cell culture | mammalian: suitable |
| 杂质 | Porcine parvovirus, none detected (9 CFR) |
| pH值(酸碱度) | 7.0-9.0 |
| web metadata keyword.default | tissue dissociation, adherent cell passaging, adherent cells, adherent cell release |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
| WGK | WGK 1 |
| 闪点(F) | Not applicable |
| 闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich
m.cnreagent.com
