产品说明

一般描述

尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UNG)含有在原核生物和真核生物中发现的同名酶的高活性重组形式。它水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶-糖苷键，切除尿嘧啶，并在 DNA 中产生碱敏感的脱碱基位点。核酸内切酶、加热或碱处理可水解这些脱碱基位点。根据 DNA 的制备方式，尿嘧啶-DNA 糖基化酶可用于实现一般的、位点特异性的或链特异性的 U-DNA 切割。

特异性

• 尿嘧啶-DNA 糖基化酶水解单链和双链 DNA 中 U-DNA 位点的尿嘧啶糖苷键，切除尿嘧啶，并在 DNA 中形成碱敏感的脱碱基位点。
• 该酶对单链 DNA 的活性高于双链 DNA。
• 对小 U-DNA 寡核苷酸和 dUMP 也具有活性(Duncan，未发表的研究结果)。
• 尿嘧啶-DNA 糖基化酶对 RNA 和天然的无尿嘧啶 DNA 无活性。

应用

尿嘧啶-DNA 糖基化酶可用于在已掺入脱氧尿苷酸残基的任何位点切割 DNA。U-DNA 可以通过体外方法(如 PCR)制备。根据 DNA 的制备方式，尿嘧啶-DNA 糖基化酶可以实现一般的、位点特异性的或链特异性切割。因此，尿嘧啶-DNA 糖基化酶可以帮助您：

• 预防 PCR 中的携带污染
• 提高定点突变实验的效率
• 标记寡核苷酸探针

质量

通过在扩增反应之前，添加约 10⁵dU(含有模板) 来检测携带预防活性。UNG 处理后，检测不到扩增产物。该酶不含任何污染的外切或内切核酸酶，并且经检测不含 RNA 酶。

单位定义

一个单位的尿嘧啶-DNA 糖基化酶是在 +37℃ 下，在 60 分钟内能够完全降解 1 μg 纯化的含有尿嘧啶的单链 DNA(噬菌体 M13，生长在 大肠杆菌 CJ 236 dut-ung- 中)所需的酶量。
一个 Lindahl 单位的酶是指在 +37℃ 下，在 1 分钟内能释放 1 μmol 尿嘧啶所需的酶量。根据我们的单位定义，一个 Lindahl 单位对应于 520,000 U。

体积活动：1 U/μl

外形

提供 1U/μl 的该酶，溶于储存缓冲液。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

产品性质

安全信息