产品说明
应用
胰蛋白酶溶液已被用于角质形成细胞的分离和染色。在一项培养墨西哥钝口螈的胚胎心肌细胞的研究中,它也被用作 CMF-Steinberg 溶液的成分,替代离心后的心脏组织。
胰蛋白酶消化多肽时,胰蛋白酶:多肽使用约 1:100 至 1:20 的比例。该产品的典型用途是去除培养表面的贴壁细胞。使细胞脱离其底物所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养时间。胰蛋白酶也被用于细胞培养过程中的细胞重悬,蛋白质组学研究中的蛋白质消化和各种凝胶消化。其他的应用还包括通过基于膜的技术评估结晶,并在一项研究中确定蛋白质折叠速率和产量可能受到动力学陷阱存在的限制。
生化/生理作用
胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基 C 末端的肽。如果酸性残基位于裂解站点两侧,则该反应的水解速率减慢,如果脯氨酸残基位于裂解站点的羧基侧,则水解停止。胰蛋白酶活性的最适 pH 为 7-9。胰蛋白酶也可裂解氨基酸合成衍生物的酯键和酰胺键。向胰蛋白酶溶液中加入 EDTA,作为螯合剂,可中和钙和镁离子,使胰蛋白酶作用的肽键模糊。去除这些离子会增加酶的活性。
DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等丝氨酸蛋白酶抑制剂可抑制胰蛋白酶。
注意
本品应在-20℃ 冷冻保存
单位定义
使用 BAEE 作为底物,一个 BAEE 单元,将在 pH 7.6,25℃ 下,每分钟产生 0.001 的 A253。
制备说明
这是 2.5 g/L 猪胰蛋白酶溶液,溶于含酚红的 Hank 平衡盐溶液中。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.21.4 ( BRENDA | IUBMB ) |
MDL编号 | MFCD00082094 |
NACRES | NA.75 |
产品性质
生物来源 | Porcine pancreas |
质量水平 | 400 |
无菌性 | sterile-filtered |
产品线 | BioReagent |
形式 | solution |
分子量 | 23.4 kDa |
浓度 | 1 × |
technique(s) | cell culture | mammalian: suitable |
杂质 | Porcine parvovirus, none detected (9 CFR) |
pH值(酸碱度) | 7.0-7.6 |
web metadata keyword.default | tissue dissociation, adherent cell passaging, adherent cells, adherent cell release |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 3 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich