产品说明
一般描述
胶原酶是一种蛋白酶,可切割三螺旋结构的蛋白,即胶原蛋白。溶组织梭菌 产生六种类型的胶原酶,即α、β、γ、δ、ε和λ。这些胶原酶对结缔组织具有活性,并且对明胶的反应性高于胶原。来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶具有非常强的活性,它在低至4-10℃的温度下可从两端消化胶原蛋白。
特异性
胶原酶可降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶,一种胰蛋白酶样酶,以及中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。
酶活性:
胶原酶活性:>0.15U/mg(根据Wünsch)(+ 25℃,4-苯基-偶氮苄-氧羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
污染酶活性:胰蛋白酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白水解酶活性
胶原酶A具有平衡的酶活性比例。
应用
来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶被广泛用于许多组织类型(例如,肺、心脏、肌肉、骨骼、脂肪组织、肝脏、肾脏、软骨、乳腺、胎盘、血管、脑、肿瘤和脐带等)的解离,并用于制备单细胞悬浮液以便建立原代细胞培养系统。当产量、活力和功能性很重要时,推荐使用胶原酶A。
Roche公司的梭菌 原酶已被用于制备来自多种组织的细胞,如肝细胞、脂肪细胞、胰岛细胞、上皮细胞、肌细胞、内皮细胞 等。但是,应根据经验确定各批次的酶是否适用于特定组织的解离。
单位定义
单位定义:来自Roche的胶原酶以Wünsch单位表示(在+25℃ 下,每分钟使用Wünsch底物生成1 μmol产物)。
通常,胶原酶活性以Mandl单位表示(在+37℃下,在5小时内从胶原中释放1 μmol亮氨酸)。
遗憾的是,两种活性单位之间没有一致的换算因数,因为Mandl单位部分取决于胶原酶制剂中污染蛋白酶的浓度,而这是一个不确定变量。实际上,高纯度胶原酶制剂的Mandl单位比酶活要低于粗制胶原酶制剂。梭菌 制剂的换算因数通常约为1:1800(例如 ,指定批次的 梭菌 胶原酶含有约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
内容物
冻干粉,非无菌
制备说明
激活剂:Ca2+
抑制剂:
胶原酶抑制剂:EDTA,EGTA,Cys,His,DTT,2-巯基乙醇
血清不抑制胶原酶。
梭菌蛋白酶抑制剂:TLCK
胰蛋白酶抑制剂:抑肽酶、胰蛋白酶抑制剂(蛋清、大豆)、血清
工作浓度:0.5至2.5 mg/ml
储存条件(工作溶液):-15至-25 ℃
罗氏建议仅重新配立即使用所需的冻干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25 ℃下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了,所以要避免反复冻融。
重悬
可重悬于任意平衡盐溶液(如,HBSS)
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
装运条件可能会有所不同。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB ) |
产品性质
质量水平 | 100 |
无菌性 | non-sterile |
形式 | lyophilized |
包装 | pkg of 100 mg (10103578001) pkg of 2.5 g (11088793001) pkg of 500 mg (10103586001) |
manufacturer/tradename | Roche |
最佳pH | 6.0-8.0 |
运输 | wet ice |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H315 - H319 - H334 - H335 |
预防措施声明 | P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311 |
危险分类 | Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3 |
靶器官 | Respiratory system |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |
Sigma-Aldrich