产品说明
一般描述
分散酶是一种中性、速效、温和的蛋白酶,可将完整的表皮与真皮分开。它还将培养的完整上皮细胞与基质分离。它裂解基底膜区,使上皮细胞保持完整。
特异性
分散酶® 是一种非特异性金属蛋白酶。
应用
分散酶® 用于制备来自多种不同组织和器官的细胞。 该酶已被证明是一种快速、有效但温和的试剂,用于破坏组织的细胞外基质,以释放单细胞用于细胞培养(原代细胞培养)或收获已在培养物中的细胞以转移至新基质(二次培养)。此外,其还可用于防止悬浮培养细胞的不必要聚集。
特点和优势
产品规格
酶活性: = 10U/mg(+ 37℃,底物为酪蛋白,pH 7.5)
抑制剂: EDTA,EGTA,Hg 2 + ,其他重金属。分散酶不被血清抑制。
单位定义
一个单位是在测定条件 (pH 7.5,+37 ℃) 下 1 分钟内从对应于 1 μmol (181 μg) 酪氨酸的酪蛋白中释放出叶酸阳性氨基酸和肽的酶活性。
分散酶®的 RAS 单位与日本文献中引用的 RAS 单位(1,000 至 2,000 分散酶®单位/ml 的浓度并不少见)的实际比较表明,1 个罗氏分散酶® I 应用科学单位约等于 416 个日本分散酶单位®。
1 个单位的罗氏应用分散酶®等于 181 个蛋白酶单位 (PU),以 pH 7.5 和 + 37℃ 下相当于每分钟每毫升 1 μg 酪氨酸的氨基酸释放量测量。
外形
白色冻干粉,冻干前通过 0.2 μm 过滤m 孔径膜
制备说明
激活剂:最适 Ca2+ 浓度为 2 mm,酶制剂中含有足够的 Ca2+,以达到最佳活性。
工作浓度: 0.6~2.4 U/mL
工作溶液:贮备液和工作溶液的制备:
为制备 10 mg/mL 贮备液,将冻干分散酶® I 酶溶于 HEPES 缓冲盐水 (50 mM HEPES/KOH pH 7.4,150 mM NaCl) 中。为制备工作液,用分离细胞的培养基稀释上述贮备液,最终浓度为 0.6-2.4 U/mL。请注意,不建议浓度高于 2.4 U/mL。为获得最佳结果,使用 0.22μm 过滤器膜。
储存条件(工作溶液):-15℃ 至-25℃
复溶贮备液在 2 ~ 8℃ 下可稳定保存 2 周。储存长达 2 个月时,贮备液应等分冷冻。避免反复冻融。
用 PBS 稀释的工作液在 2~8℃ 可稳定保存 3 天。
储存及稳定性
2至8 ℃储存。(干燥储存!)
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
法律信息
Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.4 ( BRENDA | IUBMB ) |
产品性质
质量水平 | 100 |
形式 | lyophilized |
specific activity | ≥10 units/mg protein (20 U/vial (37 ℃, casein as substrate, pH 7.5)) |
包装 | pkg of 10 × ~2 mg |
manufacturer/tradename | Roche |
最佳pH | 6.0-8.5 |
运输 | wet ice |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H315 - H319 - H334 - H335 |
预防措施声明 | P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311 |
危险分类 | Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3 |
靶器官 | Respiratory system |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |
Sigma-Aldrich