产品说明
一般描述
分散酶是一种中性、快速反应、温和的蛋白酶,能将表皮从真皮中完整分离。它还能将培养的上皮细胞从基质中完整分离出来。其可分裂基底膜区,使上皮细胞保持完整。
特异性
分散酶是一种非特异性的金属蛋白酶。
应用
分散酶®用于从多种不同的组织和器官制备细胞。该酶已经证实是一种快速、有效但温和破坏组织胞外基质的制剂,可释放用于细胞培养的单细胞(原代细胞培养)或收集培养细胞以转至新底物中(继代培养)。此外,它还可用来防止细胞悬浮培养过程中形成不必要的团块。
特点和优势
单位定义
一单位是指在pH 7.5、+37 ℃反应条件下,在1分钟内释放出对应1 μmol (181 μg)酪氨酸的Folin-阳性的氨基酸和肽类所需的酶量。
Roche分散酶®II单位与日本文献中引用的分散酶单位(其中分散酶®浓度为1,000到2,000单位/ml的情况不常见)的实际比较结果表明,Roche的1单位分散酶大致相当于日本的600单位。
Roche Applied Science的1单位®相当于181蛋白酶单位(PU),其中PU为在pH 7.5和+37 ℃条件下,在1分钟内释放相当于1 μg酪氨酸的氨基酸所需的酶量。
制备说明
激活剂:最佳Ca2+ 浓度为2mM。酶制剂含有维持最佳活性所需的足量Ca2+。
抑制剂:EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金属。分散酶不受血清抑制。
工作浓度:0.6至2.4 U/ml
工作溶液:储备溶液和工作溶液制备:
制备10mg/ml的储备溶液,将分散酶®II冻干粉溶于HEPES-缓冲盐溶液中(50 mM HEPES/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)。制备工作溶液,将上述储备溶液用分离细胞培养基稀释至终浓度为0.6到2.4U/ml。请注意,建议浓度不要高于2.4U/ml。为实现最佳结果,用0.22μm滤膜过滤工作溶液。
储存条件(工作溶液):-15 至 -25 ℃
复溶的储备溶液在2至8℃下可稳定保存2周。如需保存2个月以上,储备溶液需分装冻存。避免反复冻融! 采用PBS稀释的工作溶液在2至8℃下可稳定保存3天。
储存及稳定性
2至8 ℃储存。(干燥储存!)
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
法律信息
Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.4 ( BRENDA | IUBMB ) |
产品性质
质量水平 | 100 |
生物来源 | bacterial |
无菌性 | non-sterile |
形式 | lyophilized |
specific activity | ≥0.8 units/mg protein (37 ℃, casein as substrate, pH 7.5) |
包装 | pkg of 5 × 1 g |
manufacturer/tradename | Roche |
最佳pH | 6.0-8.5 |
application(s) | sample preparation |
运输 | wet ice |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H315 - H319 - H334 - H335 |
预防措施声明 | P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311 |
危险分类 | Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3 |
靶器官 | Respiratory system |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |
Sigma-Aldrich