产品说明
一般描述
属性:它是一种双链特异性内切核酸酶,需要二价阳离子激发最大活性。
活性:根据Kunitz,每瓶含有10,000U(+ 25℃;DNA作为底物)。
单位定义:一个单位表示在测定条件下导致吸光度以0.001 /min的速率增加的酶活力。
它是一种双链特异性内切核酸酶,需要二价阳离子激发最大活性。
应用
特点和优势
内容物
冻干粉
单位定义
根据Kunitz,一个酶活力单位表示在测定条件下,在1ml中,导致260nm处的吸光度以0.001 /min的速率增加。体积活性是在0.1M乙酸钠,5mM MgSO4,pH 5.0条件下进行测定。
检测混合物:将小牛胸腺DNA(100 μg)与20至50U DNase I在+ 25℃下进行孵育。
对260nm处吸光度的增加进行测定。
信息说明:由于Kunitz检测具有高重复性和灵敏度,因此根据Kunitz检测,选择这些条件用于活性测定。当将该酶用于正常实验目的时,罗氏公司建议使用适合特定应用的孵育缓冲液,例如,在标准文献中所提到的缓冲液(Sambrook et al., Curr.Prot.Mol.Biol., etc.)。
制备说明
激活剂:该酶需要二价阳离子激发最大活性。反应的特异性取决于所用阳离子的性质。在Mg2+存在的条件下,DNase I可在dsDNA上造成单链缺口,而在Mn2+存在的情况下,该酶可引起双链断裂。
储存条件(工作液):长期保存溶解酶
通常推荐溶解DNase I的溶剂是水。当DNase I在水中重构时,溶液可在2℃至8 ℃ 下保存2天,在-15℃至-20 ℃ 下保存1个月。为获得最佳效果,请制备适当的等分试样,避免反复冻融。然而,如需长期储存,则请将DNase I小心地溶解于下列缓冲液。在缓冲液1中,酶可稳定保存数周。如果溶解在缓冲液2、3或4中且在建议的温度下储存,则酶将稳定保存至少18个月。
信息说明:溶解时不要对酶进行涡旋混匀!
缓冲液1:20mM Tris-HCl、20mM MgCl2、5mM CaCl2、0.1mM二硫赤藓糖醇、0.1mM EDTA、50% (v/v)甘油,pH 8。此溶液储存在-15℃至-25℃条件下,不会冻结,且可稳定保存数周。
缓冲液2:20mM Tris-HCl、50mM NaCl、1mM二硫赤藓糖醇、100μg/mL BSA、50% 甘油(v / v),pH 7.6。此溶液可在-15℃至-25℃条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液3:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2、50% (w/v)甘油,pH 7.5。此溶液可在-15℃至-25℃条件下最长储存18个月,且不会冻结。
缓冲液4:20mM Tris-HCl、1mM MgCl2,pH 7.5。等量分装(例如,10 μ),在干冰上对等分试样进行快速冷冻,并在-60℃或更低温度下最长储存18个月。仅解冻每个实验所需用量。不可冷冻。弃去解冻后剩余的全部溶液。
其他说明
仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
产品性质
质量水平 | 100 |
重组 | expressed in Pichia pastoris |
形式 | lyophilized |
包装 | pkg of 2 × 10,000 U |
manufacturer/tradename | Roche |
运输 | wet ice |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H317 - H334 |
预防措施声明 | P261 - P280 - P284 - P304 + P340 - P333 + P313 - P342 + P311 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1 |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |
Sigma-Aldrich