KAPA HRM FAST

产品说明

一般描述

高分辨率熔解(HRM)分析是一种通过快速、高通量聚合酶链反应(PCR)分析核酸序列中基因突变或遗传变异的技术。KAPA HRM FAST预混液包含新型DNA聚合酶和缓冲液系统，以及EvaGreen^®饱和染料，经过优化可最大程度区分序列变异体。KAPA HRM FAST PCR试剂盒是一种方便的即用型预混液。

应用

KAPA HRM FAST 已被用于：

• 单核苷酸多态性(SNP)基因分型
• 高分辨率熔解 (HRM) 分析-突变发现(基因扫描)
• 杂合性筛选
• DNA指纹分析
• DNA甲基化分析
• 扩增子或等位基因扩增
• 单菌落基因组编辑筛选

特点和优势

实现序列变异差异最大化

• 旨在实现熔化行为差异最大化。
• 提高灵敏度。

• 95% 的检测水平，即使竞品失败。
• 缩短反应时间。

• 与 KAPA Express Extract 试剂盒配合使用时，可在 2 小时内完成提取、扩增和 HRM。

• KAPA HRM FAST PCR 试剂盒包含一种饱和双链 DNA 染料 EvaGreen，可优化用于 HRM 分析。
• 2X Master Mix 包含优化后可用于 HRM 分析的缓冲系统和增强扩增效率的新型 DNA 聚合酶。 Master Mix 不含 MgCl ₂ 。
• 不同样品的模板 DNA 应采用相同的方法制备，并在相同的缓冲液(最好为 10 mM Tris-HCl，pH 8.5)中洗脱或稀释。
• 模板 DNA 的最佳用量为每 20μL反应20ng至100ng。
• 为了最大限度地提高检测的灵敏度，在不影响 PCR 反应效率的情况下，使用可使用的最低浓度的引物(每种引物0.1 μM – 0.3μM)。
• 在 HRM 过程中，MgCl ₂ 的浓度对杂合子的退火和扩增子的熔解有很大的影响。推荐的起始浓度为 2.5 mM MgCl ₂ ，可根据需要进行调整。对于大多数 HRM 测定，推荐使用 1.5–3.5 mM 最终 MgCl ₂ 。
• 可能必须使用 KAPA HRM FAST PCR 试剂盒调整仪器增益设置以获得最大灵敏度。

质量

所有试剂盒组分均经过严格的功能质量控制，无可检测的污染外切和核酸内切酶活性，并符合 DNA 污染方面的严格要求。

制备说明

使用前，务必确保组分已完全解冻并充分混合。KAPA HRM FAST qPCR Master Mix (2X) 即使在-20℃ 下储存，也可能无法冷冻。
KAPA HRM FAST qPCR Master Mix (2X) 中包含的 EvaGreen 染料对光敏感。长时间暴露于直射光下会导致荧光信号强度的损失。
KAPA HRM FAST qPCR Master Mix (2X) 通过30次冻融循环可稳定保存。确保所有试剂在不使用时均避光储存于-20℃ 条件下。避光条件下，试剂在 4℃ 黑暗环境中至少可稳定保存一周，只要确保不被微生物和/或核酸酶污染，短期内使用可在此温度下储存。

其他说明

仅供研究使用。不可用于诊断过程。

法律信息

本产品的某些应用涵盖在向 Kapa Biosystems 以外的其他方颁发的专利中，并适用于某些国家。本产品的采购不包括进行任何此类申请的许可。因此，本产品的用户可能需要根据产品的具体应用和使用国家获得专利许可。

下列一项或多项美国专利和相应的美国境外专利权利要求涵盖了本产品的使用：5,994,056、6,171,785 和 5,928,907(权利要求编号 12-24、27-28)。根据前述专利权利要求，本产品的购买包括有限的、不可转让的诉讼豁免，仅用于购买者的内部研究。任何其他专利权利要求项下的权利(例如美国专利号 6,814,934 中的装置或系统权利要求)和履行任何类型商业服务的权利，包括但不限于以费用或其他商业对价报告购买者活动结果的权利，均未以明示、暗示或禁止反言的方式予以传达。本产品仅供研究使用。罗氏专利下的诊断用途需要罗氏的单独许可。关于购买许可证的更多信息，可联系 Applied Biosystems,850 Lincoln Centre Drive,Foster City,California 94404,USA 许可总监。

美国生物技术公司。Biotium Inc. 获得许可。销售含 EvaGreen 染料的试剂，用于实时 PCR，仅用于研究目的。

根据美国专利号 5,338,671 和 5,587,287 以及其他国家的相应专利获得许可。

本产品的采购包括美国专利号 6,174,670、6,569,627 和 5,871,908 的特定权利要求下的有限、不可转让许可，由犹他大学研究基金会或 Evotec Biosystems GmbH 所有，授权给 Idaho Technology,Inc.。根据规定的方案，仅使用随附的产品量。根据美国专利号 6,174,670、6,569,627 和 5,871,908 的任何权利要求，除此处包含的产品数量外，不得以明示、暗示或禁止反言的方式传达使用任何仪器或系统的权利。

Biotium,Inc. 的注册商标。
Rotor-Gene 是 Corbett Research 的商标。
EvaGreen is a registered trademark of Kapa Biosystems

基本信息

产品性质

组份列表

组份不可单独销售

安全信息