产品说明
应用
来源于白色念球菌(Tritirachium album)的蛋白酶K已被用于:
生化/生理作用
蛋白酶K具有广泛的特异性,即使在天然状态下也可降解许多蛋白质。它主要切割脂肪族和芳香族氨基酸(带有封闭的α-氨基)的羧基相邻的肽键。根据氨基酸序列,蛋白酶K的分子量为28,930Da 根据SDS-PAGE,其分子量为28,500Da。最适pH值在7.5-9.0之间 其等电点为8.9。其需要Ca2+(1-5mM)进行激活。蛋白酶K可被DIFP(二异丙基氟磷酸盐)或PMSF(苯甲基磺酰氟)抑制。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。
单位定义
在pH7.5,37℃条件下,一个单位每分钟可将尿素变性血红蛋白水解并生成相当于1.0 μmole酪氨酸的颜色(利用Folin-Ciocalteu试剂进行显色)。
外形
溶于含有10mM Tris-HCl(pH 7.5)和1mM乙酸钙的40%甘油(v / v)溶液中。
法律信息
PicoGreen is a registered trademark of Life Technologies
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.21.64 ( BRENDA | IUBMB ) |
MDL编号 | MFCD00132129 |
NACRES | NA.54 |
产品性质
质量水平 | 200 |
等级 | for molecular biology |
形式 | buffered aqueous glycerol solution |
分子量 | 28.93 kDa |
浓度 | ≥10 mg/mL ≥800 units/mL |
杂质 | ≤0.5 ppm DNA (PicoGreen® assay) |
异质活性 | DNase, Nickase and RNase, none detected |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H334 |
预防措施声明 | P261 - P284 - P501 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 |
储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
个人防护装备 | Eyeshields, Faceshields, Gloves, type ABEK (EN14387) respirator filter |
Sigma-Aldrich