产品说明
一般描述
CRISPR(聚类规则间隔短回文重复序列)属于II型CRISPR/CAS9系统。它是化脓链球菌SF370的适应性免疫系统的一部分，通过以序列依赖的方式切割外源DNA来免受病原体′靶基因的侵害。适配于在真核细胞中表达的II型CRISPR/Cas系统由四个基因组成，包括Cas9(CRISPR相关蛋白)核酸酶、两个非编码CRISPR RNA(crRNA或gRNA)、反式激活crRNA(tracrRNA)以及前体crRNA(pre-crRNA)阵列。pre-crRNA含有被相同直接重复序列(DR)间隔开的核酸酶向导序列(间隔子)。
可以通过单个gRNA对Cas9内切核酸酶进行改造，从而将DNA双链断裂(DSB)导向所需的基因组位置。与由锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB类似，细胞随后激活内源DNA修复过程[非同源末端连接(NHEJ)或同源定向修复(HDR)]，以愈合目标DSB。
与设计者锌指(ZFs)、转录激活因子样效应物(TALE)和归巢核酸酶等其他基因组编辑技术相比，CRISPR/CAS9系统可扩展、可负担且易于改造。因此，抗-CRISPR/CAS9抗体可用于检测CRISPR/CAS9阳性转染的细胞、揭示基因组中的DSB位点和ChIP(染色质免疫沉淀)相关检测。
CAS9，也称为聚类规则间隔短回文重复序列(CRISPR)相关蛋白-9核酸酶，，是II型CRISPR -RuvC(RNase H样折叠)Cas系统的特征基因。CAS9含有1388个氨基酸。经预测，该蛋白质含有可参与CRISP RNA(crRNA)成熟的RuvC/核糖核酸酶(RNase)H结构域和可参与DNA降解步骤的McrA/HNH特征结构域。
免疫原
化脓性链球菌Cas9 C末端区域的重组蛋白
应用
抗-CRISPR/CAS9(C末端)单克隆抗体可识别CAS9构建体过表达系统中的CAS9蛋白。该抗体可成功识别Cas9突变体，包括切口酶Cas9和失活Cas9(dCas9)。该抗体可用于各种免疫化学技术，包括免疫印迹、免疫荧光和免疫沉淀。抗-CRISPR/CAS9(C末端)单克隆抗体不与来自弗朗西丝菌的FnCas9以及来自酸性氨基球菌( BV3L6株)和毛螺旋菌ND2006的Cpf1蛋白存在交叉反应性。
生化/生理作用
CAS9在质粒DNA干扰中起着至关重要的作用。它是唯一对外源DNA具有抗性的Cas蛋白。CAS9可刺激RNA向导的基因组编辑和各种生物体中的基因调控，但它可以在任何给定细胞内一次仅促进一种活性。
外形
本品为溶液形式，溶于0.01M磷酸盐缓冲盐水，pH 7.4，含有15 mM叠氮化钠作为防腐剂。
储存及稳定性
若需连续使用，可在2-8℃下保存最长一个月。若需延长储存时间，可将溶液分装并冷冻。不建议反复冻融。如果长期储存时出现轻微浑浊，请在使用前通过离心澄清溶液。若工作稀释样品在12小时内未使用完，则应丢弃。
其他说明
本产品仅供研发使用，不得用于药物、家庭或其他用途。
为了在不同的技术和制备中获得最佳结果，我们建议通过效价测试确定最佳的工作浓度。
产品性质
| 质量水平 | 200 |
| 抗体形式 | purified from hybridoma cell culture |
| antibody product type | primary antibodies |
| 克隆 | 10C11-A12, monoclonal |
| 形式 | buffered aqueous solution |
| 浓度 | ~1.00 mg/mL |
| technique(s) | immunoblotting: 1-2 μg/mL using whole extracts of human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein immunofluorescence: 1.25-2.5 μg/mL using human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein immunoprecipitation (IP): 5-10 μg/test using whole extract of human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein |
| UniProt登记号 | Q99ZW2 |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
| 闪点(F) | Not applicable |
| 闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich
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