产品说明
一般描述
诸如胰蛋白酶、胶原酶和链霉蛋白酶等蛋白水解酶通常用于分散组织和细胞。但是,这些酶通常会损伤细胞,在培养过程中不稳定,其也可能是异质的,并且可能成为支原体污染的来源。分散酶-II可用于从多种不同的组织和器官中制备细胞。分散酶-II已被证明是一种快速有效且温和的试剂,可用于分离许多体外生长的组织和细胞。由于它不会破坏细胞膜,分散酶特别适用于组织分解和继代培养。
已验证PluriSTEM 分散酶-II可与PluriSTEM人ES/iPS培养基(SCM130)一起用于人胚胎和诱导多能干细胞的培养和传代。
分散酶-II在多粘芽孢杆菌中产生。
应用
研究类别
干细胞研究
研究子类别
酶&生物化学
最佳传代技术必须由最终用户进行确定,并根据细胞类型和培养条件而有所不同。
1.用1:20 Matrigel涂层(每孔1.5 ml)涂覆6孔板。 在2-8ºC孵育过夜或在室温涂覆至少30分钟至1小时后再使用。
2.去除基质胶涂层。 每孔添加2 mL完全培养基。
3.去除培养物中的分化区域。
4.吸出培养基。
5.用2 mL PBS洗涤一次。
6.每孔加入1.5 mL 分散酶II。 37ºC孵育7分钟。
7.用2 mL不含Mg和Ca的PBS洗涤2次。
8.向每个孔中加入2 mL完全培养基,并使用细胞刮刀分离菌落。
9.将刮下的细胞收集在15 ml锥形管中。
10800 rpm离心5分钟
11.重悬在适当体积的完全培养基中。 典型的稀释比为1:5 – 1:6,其取决于细胞密度。 细胞在5-6天内可使用PluriSTEM Human ES/iPS培养基进行传代。
质量
溶液为红色,无颗粒存在。该溶液是无菌的,适用于细胞培养应用。
外形
产品以无菌DMEMF12的形式提供,浓度为1 mg/ml。在冷冻之前,产品已通过0.2微米的过滤器过滤。
Dispase-II酶是在多粘芽孢杆菌中产生的。
产品以无菌DMEMF12的形式提供,浓度为1 mg/ml。冻冷前,产物已通过0.2微米的过滤器过滤。
储存及稳定性
自收货之日起,在-20°C下最多保存4个月。解冻后,请以较小的工作量分装并储存在-20ºC。避免多次冻融循环以保持适当的酶活性。
法律信息
PLURISTEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免责声明
除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。
基本信息
eCl@ss | 32160801 |
NACRES | NA.75 |
产品性质
质量水平 | 100 |
形式 | liquid |
manufacturer/tradename | PluriSTEM® |
浓度 | 1 mg/mL in sterile DMEM/F-12 |
technique(s) | cell culture | mammalian: suitable cell culture | stem cell: suitable |
运输 | dry ice |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich