产品说明
一般描述
重组酶与最初从白色念球菌(Tritirachium album)中分离出来的天然蛋白酶相同。重组酶的规格与天然蛋白酶的规格相同。氨基酸序列(分子量)和分子结构相同。但是,重组酶比天然酶的纯度更高,因为根据当前质量控制程序,重组酶不含DNA,因此它非常适用于分离PCR和RT-PCR模板。
蛋白酶K是枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,无明显的切割特异性。
该酶还具有冻干形式。
应用
特点和优势
蛋白酶K能够切割氨基酸X和Y(X-↓-Y)之间的蛋白质,其中X =脂族、芳族或疏水氨基酸,Y = 任何氨基酸。该酶对天然蛋白质非常有效,因此,可快速灭活内源核酸酶,如RNA酶和DNA酶。
质量
根据当前的质量控制程序,该制剂不含RNA酶、DNA酶和DNA。
不含核酸酶:每一批次均在各种底物上经过测试,确保不含核酸内切酶、核酸外切酶、核糖核酸酶和开口活性。
DNA含量:≤10pg/mg酶(由Threshold测定)
生物负载:≤5cfu/g(由《欧洲药典》中最严格的测试确定,该测试能确定活的需氧菌、酵母和真菌的总数)
单位定义
体积活度:约50 U/ml溶液(chromozyme测定);约600 U/ml溶液(血红蛋白测定)。一个酶活性单位是指在+25 ℃条件下在1分钟内切割18 mmol Chromozym TRY所需的酶量(相当于在血红蛋白测定中使用600 U/ml)。有关当前批次的具体值,参见分析证书。
制备说明
激活剂:加入变性剂(SDS和尿素),可刺激蛋白酶K的活性。例如,使用终浓度为2%的SDS可以显著提高蛋白酶K的活性。使用变性剂进行优化,可使蛋白酶活性提高七倍。
工作溶液:建议缓冲液:
蛋白酶K的最佳缓冲液取决于具体应用。应始终遵循参数部分中的pH和温度指南。一般来说,蛋白酶K在含有尿素、十二烷基硫酸钠(SDS)和胍盐等变性试剂的缓冲液中可保持稳定且活性非常高。
抑制剂:该酶可被Pefabloc® SC灭活。但是,它不会被金属离子、螯合剂(如EDTA)、巯基试剂或胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶抑制剂灭活。
其他说明
用于快速灭活RNA酶和DNA酶。
当过量使用且长时间孵育时,该酶可将蛋白质分解成游离氨基酸。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
法律信息
Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.23.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
产品性质
质量水平 | 100 |
重组 | expressed in Pichia pastoris |
形式 | buffered aqueous solution (18 ± mg/mL; pH 7.5) |
specific activity | ~2.5 units/mg protein (Approximately 2.5 U/mg (Chromozym assay); ≥30 U/mg hemoglobin assay. Refer to the Certificate of Analysis for specific values for the present lot.) |
包装 | pkg of 1.25 mL (03115887001) pkg of 25 mL (03115844001) pkg of 5 mL (03115828001) |
manufacturer/tradename | Roche |
最佳pH | 6.5 and 9.5 |
pH范围 | 4.0 - 12.5 |
运输 | wet ice |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H317 - H334 |
预防措施声明 | P261 - P280 - P284 - P304 + P340 - P333 + P313 - P342 + P311 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1 |
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | No data available |
闪点(C) | No data available |
Sigma-Aldrich