产品说明
一般描述
快速DNA连接试剂盒包含连接必需的所有试剂。不需要其他试剂或添加剂。该试剂盒能够在+15到+25℃条件下,快速链接DNA平末端或粘性末端。按照反应体系中DNA浓度,连接产物可能是环状(如果DNA浓度较低)或多联体(如果DNA浓度高)。连接的DNA适合直接用于转化实验
注意:连接后再使用高纯度®PCR产物纯化试剂盒,可以进行电穿孔实验。
特异性
平末端或粘性末端DNA(≤200 ng)。
热失活:65℃,10分钟(T4连接酶)
如果连接反应混合物要用非转化实验的其他实验,要使T4连接酶失活。
注意:转化实验前将连接反应混合物热失活会引起转化克隆数大量下降(>因素20)。
星活性: 必须避免星活性。当进行双酶切时容易出现星活性。查询Roche现实性内切酶公告(或Roche应用科学目录),选择特定酶组合最合适的缓冲液。可能的话,双酶切使用缓冲液H。
应用
快速DNA连接试剂盒共价连接粘性末端或平末端DNA片段,从而:
特点和优势
包装
1个试剂盒包含3种组分。
制备说明
孵育时间:5分钟
DNA连接摩尔比例:标准连接反应中,载体DNA和插入DNA摩尔比例一般为1:3。然而,只要适合,你也可以使用其他比例。比如:
如果两条DNA长度差异大,可以尝试1:1或1:2比例
如果两条DNA是平末端,尝试1:5比例
其他说明
新快速DNADephos & 连接试剂盒包含了所有快速DNA连接试剂盒试剂,外加我们的新快速碱性磷酸酶。
法律信息
High Pure is a registered trademark of Roche
产品性质
质量水平 | 100 |
用途 | sufficient for 40 reactions (DNA ligation) |
manufacturer/tradename | Roche |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
货号 | 组份 |
Dilution Buffer 5x concentrated | |
T4 DNA Ligation Buffer 2x concentrated | |
T4 DNA Ligase 5 U/μl |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |
Sigma-Aldrich