产品说明
应用
胶原酶已用于动脉组织的制备，用于晚期糖基化终产物 (AGE) 的研究。这种酶还与其他蛋白酶一起用于人类肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮和许多其他组织的解聚。在肝脏和肾脏灌注研究、胰腺的消化和非实质肝细胞的分离中也有效。也适用于大鼠附睾脂肪垫脂肪细胞的制备。
生化/生理作用
有效地从组织中释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的共同作用。每摩尔酶用 4 克原子钙 (Ca2+) 激活胶原酶。一般认为培养滤液至少含有 7 种不同的蛋白酶，分子量范围为 68-130 kDa(最适用 pH：6.3-8.8)。该酶识别序列-R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-，其中 X 是最常见的中性氨基酸。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
注意
供应的产品可在-20℃ 下可稳定保存一年。在 37℃、50℃ 和-20℃ 条件下储存 30 天，FALGPA 或蛋白酶活性无损失。快速冷冻 (10 mg/mL) 并在-20℃ 下冷冻时，粗胶原酶溶液是稳定的。进一步冻融循环将破坏溶液。置于冰上 7 小时后，产品仍保持 100% 活性。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
本品由溶组织梭菌的 Ⅱ 型 (C6885) 胶原酶制备而成。通常在 37℃ 下用 TESCA 缓冲液(含 50 mM TES，0.36 mM 氯化钙，pH 7.4)制备 1-2 mg/mL 溶液。溶液还含有梭菌蛋白酶、非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
基本信息
| 酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB ) |
| EC 号 | 232-582-9 |
| MDL编号 | MFCD00130830 |
| NACRES | NA.54 |
产品性质
| 质量水平 | 200 |
| 无菌性 | 0.2 μm filtered |
| 形式 | lyophilized powder |
| specific activity | 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid |
| 分子量 | 68-125 kDa |
| 适用性 | release of physiologically active rat epididymal adipocytes tested |
| application(s) | diagnostic assay manufacturing |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 象形图 |  |
| 警示用语： | Danger |
| 危险声明 | H334 |
| 预防措施声明 | P261 - P284 - P501 |
| 危险分类 | Resp. Sens. 1 |
| 储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
| WGK | WGK 1 |
| 闪点(F) | Not applicable |
| 闪点(C) | Not applicable |
| 个人防护装备 | dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves |
Sigma-Aldrich
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