产品说明
应用
来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于两种类似于脱氧核糖核酸酶I的新型人类基因的鉴定、定位和表达。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I也已用于研究可从牛胰腺中获得高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的新方法。
DNAse I可用于切开DNA,作为将标记碱基插入DNA的第一步。来自Sigma的酶已在Madin-Darby犬肾(MDCK)II细胞系的细胞裂解物制备中与RNAse一起用于核酸酶的储备。它也用于从辛德比斯病毒中提取RNA。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。
包装
10000 units in glass bottle
20000, 40000, 200000, 500000 units in poly bottle
生化/生理作用
DNase I是一种内切核酸酶,可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时,DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时,两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A,B,C和D组成,它们的摩尔比分别为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。
单位定义
一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时,在 pH 5.0,25℃的条件下在每ml每分钟内可引起0.001的A260变化。
外形
含有氯化钙
制备说明
酶粉可使用水或除磷酸盐缓冲液外任何pH 4.0-9.0的缓冲液进行重悬。应避免钙螯合剂。溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 ℃一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 ℃则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时,它可在60 ℃维持活性最长达五小时,并在68 ℃ <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液((pH 7.2),1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。
分析说明
蛋白由双缩脲法测定。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
EC 号 | 232-667-0 |
MDL编号 | MFCD00130918 |
NACRES | NA.54 |
产品性质
质量水平 | 300 |
类型 | Type II |
形式 | lyophilized powder |
specific activity | ≥2,000 units/mg protein |
分子量 | ~31 kDa |
纯化方式 | chromatography |
组成 | Protein, ≥80% |
溶解性 | 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear |
application(s) | diagnostic assay manufacturing diagnostic assay manufacturing |
异质活性 | Chymotrypsin ≤0.01% Protease ≤0.005% RNase ≤0.01% |
运输 | wet ice |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H334 |
预防措施声明 | P261 - P284 - P304 + P340 + P312 - P501 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 3 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich